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非發(fā)酵菌的種類與鑒定試驗

更新時間:2018-12-13  |  點擊率:2279

非發(fā)酵菌是指一群不能發(fā)酵葡萄糖或僅能以氧化形式利用葡萄糖的革蘭氏陰性桿菌。部分非發(fā)酵菌在臨床上具有致病性,為機會致病菌。近年來此類細菌從住院病人的痰、尿、血液、體液標本中的分離率日漸增高。

 

分類與命名:

主要的非發(fā)酵G-桿菌屬被分成6個科:

假單胞菌科:根據(jù)rRNA-DNA同源性分為5個rRNA群

①rRNAⅠ群/假單胞菌屬;

②rRNAⅡ群/伯克霍爾德菌屬;

③rRNAⅢ群/叢毛單胞菌屬、食酸菌屬;

④rRNAⅣ群/短波毛單胞菌屬;

⑤rRNAⅤ群/窄食單胞菌屬;

⑥其它:鞘氨醇單胞菌屬、希瓦菌屬等

產(chǎn)堿桿菌科:產(chǎn)堿桿菌屬;

黃桿菌科:華麗桿菌屬

莫拉菌科:不動桿菌屬、莫拉菌屬;

甲基球菌科;

根瘤菌科。

非發(fā)酵菌的基本鑒定要求

缺少糖發(fā)酵的證據(jù),通常是在KIA或TSI培養(yǎng)基中無酸產(chǎn)生,斜面和底部均呈紅色。

氧化酶+(不動桿菌、嗜麥芽窄食單胞菌、唐菖蒲伯克菌、淺黃華麗單胞菌、棲稻黃素單胞菌-),但并非所有氧化酶+的G-桿菌都是非發(fā)酵菌。

麥康凱上生長很差或不生長。

動力:多為+,但多為專性需氧,故半固體培養(yǎng)基中不明顯,宜用直接動力觀察或染色法。

重要的鑒定試驗

葡萄糖利用(O/F試驗):O/F培養(yǎng)基:蛋白胨和糖類的比例為1:5而不同于發(fā)酵菌的1:2。

氧化酶試驗:細胞色素氧化酶的產(chǎn)生與否鑒別分類    

氧化酶試驗陽性的非發(fā)酵菌主要有:假單胞菌屬、伯克霍爾德菌、無色桿菌屬、希瓦氏菌屬、  黃桿菌屬、莫拉菌屬等。

氧化酶試驗陰性的非發(fā)酵菌主要有:不動桿菌屬、窄食單胞菌等。

(3)動力:半固體培養(yǎng)基:應只穿刺培養(yǎng)基頂部4 mm,在培養(yǎng)4-6小時后觀察結(jié)果,24和48小時后再次觀察結(jié)果。更準確的方法是濕片法和鞭毛染色。

(4)色素形成:非發(fā)酵菌可形成多種色素,有助于菌種的鑒定。

(5)硝酸鹽還原/產(chǎn)氣:將硝酸鹽還原成亞硝酸鹽,進而釋放氮的生化過程。

(6)吲哚試驗:需用含色氨酸豐富的培養(yǎng)基,產(chǎn)吲哚黃桿菌、腦膜敗血黃桿菌、食酸叢毛單胞菌等。

(7)硫化氫:fu bai希瓦菌是非發(fā)酵菌中在KIA和TSI上產(chǎn)硫化氫的菌種。

 

非發(fā)酵菌的鑒定程序復雜并且種類繁多,締一生物為您推薦一款快速鑒定非發(fā)酵菌的產(chǎn)品——由上,HiMedia公司生產(chǎn)的HiBio-ID™微生物生化鑒定試劑卡(盒)——非發(fā)酵菌鑒定試劑盒(貨號:KB019)

 

KB019是全面的非發(fā)酵菌標準顯色鑒定系統(tǒng)。非發(fā)酵菌屬于革蘭氏陰性,不生芽孢,多分離自臨床樣本。該試劑盒用于尿、胃腸道等臨床標本,也可用于實驗室已擁有的菌株鑒定。它包含12種傳統(tǒng)生化試驗和12種糖發(fā)酵試驗,通過微生物代謝反應導致培養(yǎng)基顏色變化。

該試劑盒包含兩個生化試劑卡,可一次性進行多種生理生化實驗,主要包括的實驗有:

 

鑒定卡1

1

吲哚試驗

2

七葉苷水解試驗

3

檸檬酸利用試驗

4

精氨酸脫羧試驗

5

硝酸鹽還原試驗

6

ONPG試驗

7

堿性磷酸酶試驗

8

苯丙氨酸脫氨試驗

9

尿素酶試驗

10

溴棕*銨耐受試驗

11

賴氨酸脫羧試驗

12

氧化酶試驗

 

鑒定卡2

1

乳糖發(fā)酵試驗

2

麥芽糖發(fā)酵試驗

3

甘露醇發(fā)酵試驗

4

海藻糖發(fā)酵試驗

5

蔗糖發(fā)酵試驗

6

阿拉伯糖發(fā)酵試驗

7

纖維二糖發(fā)酵試驗

8

果糖發(fā)酵試驗

9

半乳糖發(fā)酵試驗

10

葡萄糖發(fā)酵試驗

11

肌醇發(fā)酵試驗

12

木糖發(fā)酵試驗

 

待鑒定菌種應先進行分離和純化??稍跔I養(yǎng)瓊脂(MV001/MV1274)或腦心浸膏瓊脂(MV211)上挑取一個菌落,接種在5ml腦心浸膏肉湯中,35-37℃培養(yǎng)4-6小時,直到在620nm處,接種液濁度≥0.1OD或0.5 McFarland標準。 無菌打開試劑盒,撕掉封條。每孔接種50μl上述菌液。也可用接種環(huán)劃線。35℃-37℃孵育24-48小時后,按說明書操作。

 

締一生物作為HiMedia公司在中國的代理商,在微生物培養(yǎng)和檢測領域,會一如既往地為您帶來的服務。

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