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幾種細(xì)菌鑒定中常見(jiàn)的生理生化反應(yīng)原理介紹

更新時(shí)間:2018-12-13  |  點(diǎn)擊率:1477

各種細(xì)菌所具有的酶系統(tǒng)不盡相同,對(duì)營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)的分解能力也不一樣,因而代謝產(chǎn)物存在差別。以此用生理生化試驗(yàn)的方法檢測(cè)細(xì)菌對(duì)各種基質(zhì)的代謝作用及其代謝產(chǎn)物,從而鑒別細(xì)菌的種屬,稱(chēng)之為細(xì)菌的生理生化反應(yīng),締一生物為您介紹幾種細(xì)菌鑒定中常見(jiàn)的生理生化反應(yīng)原理:

 

糖(醇)類(lèi)發(fā)酵試驗(yàn)

 

不同的細(xì)菌含有發(fā)酵不同的糖(醇)的酶,因而發(fā)酵糖(醇)的能力各不相同,產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物也不同:有的產(chǎn)酸產(chǎn)氣,有的產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。指示劑溴甲酚紫,pH5.2黃色—pH6.8紫色,當(dāng)發(fā)酵產(chǎn)酸時(shí),培養(yǎng)基將由紫變黃。產(chǎn)氣可由杜氏小管中有無(wú)氣泡來(lái)證明。

 

甲基紅試驗(yàn)(M.R試驗(yàn))

 

甲基紅試驗(yàn),pH4.4紅色~pH6.2黃色,是用來(lái)檢測(cè)由葡萄糖產(chǎn)生的有機(jī)酸,如甲酸、乙酸、乳酸等。有些細(xì)菌分解糖類(lèi)產(chǎn)生丙酮酸,丙酮酸進(jìn)一步反應(yīng)形成甲酸、乙酸、乳酸等,使培養(yǎng)基的pH降低到4.2以下。有些細(xì)菌在培養(yǎng)的早期產(chǎn)生有機(jī)酸,但在后期將有有機(jī)酸轉(zhuǎn)化為非酸性末端產(chǎn)物,如乙醇、丙酮酸等,使pH升至大約6。

 

Voges-Proskauer試驗(yàn)(伏-普試驗(yàn),V.P.試驗(yàn))

 

伏-普試驗(yàn)是用來(lái)測(cè)定某些細(xì)菌利用葡萄糖產(chǎn)生非酸性或中性末端產(chǎn)物的能力。某些細(xì)菌分解葡萄糖成丙酮酸,再將丙酮酸縮合脫羧成乙酰甲基甲醇。乙酰甲基甲醇在堿性條件下,被氧化為二乙酰,二乙酰與培養(yǎng)基中所含的胍基作用,生成紅色化合物為V.P.反應(yīng)陽(yáng)性。

 

4.靛基質(zhì)試驗(yàn)

 

某些細(xì)菌,如大腸桿菌,能產(chǎn)生色氨酸酶,分解蛋白胨中的色氨酸,產(chǎn)生靛基質(zhì),靛基質(zhì)與對(duì)二甲基氨基苯甲酸結(jié)合,形成玫瑰色靛基質(zhì)。

 

硫化氫試驗(yàn)

 

某些細(xì)菌能分解含硫的氨基酸,產(chǎn)生硫化氫,硫化氫與培養(yǎng)基中的鐵鹽反應(yīng),形成黑色的硫化鐵沉淀,為硫化氫試驗(yàn)陽(yáng)性。

 

6.明膠液化實(shí)驗(yàn)

 

明膠在25度以下可維持凝膠狀態(tài),以固體狀態(tài)存在,而在25度以上時(shí)明膠就會(huì)液化。有些微生物可產(chǎn)生一種成為明膠酶的胞外酶,水解這種蛋白質(zhì),而使明膠液化,甚至在4度仍能保持液化狀態(tài)。

 

檸檬酸鹽利用試驗(yàn)

 

有的細(xì)菌如產(chǎn)氣桿菌,能利用檸檬酸鈉為碳源,因此能在檸檬酸鹽培養(yǎng)基上生長(zhǎng),并分解檸檬酸鹽后產(chǎn)生碳酸鹽,使培養(yǎng)基變?yōu)閴A性。此時(shí)培養(yǎng)基中的溴麝香草酚藍(lán)指示劑pH6.0(黃)~7.6(藍(lán)),由綠色變?yōu)樯钏{(lán)色。

淀粉水解實(shí)驗(yàn)

 

細(xì)菌水解淀粉的過(guò)程可以通過(guò)底物的變化來(lái)證明,即用碘測(cè)定不再產(chǎn)生藍(lán)色。

 

細(xì)菌的生理生化試驗(yàn),是菌種鑒定的關(guān)鍵性試驗(yàn),但傳統(tǒng)試驗(yàn)方法存在耗時(shí)耗力,時(shí)間過(guò)程較長(zhǎng);需要試劑、耗材、儀器較多等缺點(diǎn)。上 HiMedia公司(微生物公司)生產(chǎn)的HiBio-ID™微生物生化鑒定試劑卡(盒),較好的解決了這一問(wèn)題。

 

以上所提到的實(shí)驗(yàn),均可采取試劑盒的檢測(cè)方法,HiBio-ID™微生物生化鑒定試劑卡(盒),一個(gè)生化鑒定卡上集成了12種或24種生化試驗(yàn),無(wú)需借助其他儀器,可一次性出結(jié)果,鑒定卡的選擇依賴(lài)于各種因素,如在選擇性鑒別瓊脂上的生長(zhǎng)狀況、生長(zhǎng)時(shí)間、菌落特征、革蘭氏染色等。

 

 

HiBio-ID™微生物生化鑒定試劑卡(盒)試劑盒目前有20多種,能檢測(cè)葡萄球菌、芽孢桿菌、沙門(mén)氏菌、腸桿菌、乳桿菌等多種菌種。

 

   締一生物作為HiMedia公司在中國(guó)的代理商,在微生物培養(yǎng)和檢測(cè)領(lǐng)域,會(huì)一如既往地為您帶來(lái)的服務(wù)。

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