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Vero細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基在流感疫苗中的應(yīng)用

更新時(shí)間:2019-03-04  |  點(diǎn)擊率:1566

流行性感冒(Influenza)簡(jiǎn)稱(chēng)流感,是由流感病毒(Influenza Virus)引起的急性呼吸道疾病,流感病毒具有高度的傳染性和較強(qiáng)的變異性,每年在各個(gè)國(guó)家呈季節(jié)性流行和地區(qū)性爆發(fā),甚至世界范圍內(nèi)流行。

面對(duì)流感侵襲,人們主要通過(guò)勤洗手、帶口罩或開(kāi)展公眾教育等措施進(jìn)行預(yù)防,但這些措施并不十分有效。為有避免流感的侵襲,20世紀(jì)40年代,人們通過(guò)雞胚擴(kuò)增得到的流感疫苗株,用于人類(lèi)的流感預(yù)防*。目前,正在使用或正在研發(fā)的針對(duì)流感的疫苗包括全病毒疫苗、裂解疫苗、亞單位疫苗及冷適應(yīng)減毒活疫苗仍是使用雞胚為培養(yǎng)基質(zhì)生產(chǎn)的,然而大流感發(fā)生時(shí)不斷増長(zhǎng)的疫苗和疫情防控需求使雞胚生產(chǎn)平臺(tái)中雞胚供應(yīng)不足、卵清蛋白過(guò)敏及產(chǎn)量有限等諸多缺陷越來(lái)越明顯。

迫切需要找到一種能快速生產(chǎn)安全有效的流感疫苗的介質(zhì),世界衛(wèi)生組織(WHO)推薦利用哺乳動(dòng)物細(xì)施培養(yǎng)技術(shù)替代雞胚培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)流感疫苗。利用細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)流感疫苗具有顯著的優(yōu)點(diǎn):①細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)操作簡(jiǎn)單,可實(shí)現(xiàn)大規(guī)模培養(yǎng);②細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)中繁殖的病毒與原流感病毒分離株的匹配度更高;③雞胚生產(chǎn)的流感疫苗可能引發(fā)人體過(guò)敏反應(yīng),而通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)制備的疫苗可克服此缺點(diǎn)。

目前可用于流感疫苗生產(chǎn)的細(xì)胞系主要有狗腎腫瘤細(xì)胞系(MDCK)、非洲綠猴腎細(xì)胞系(Vero)、人視網(wǎng)膜細(xì)胞系(PER.C6)等。其中Vero細(xì)胞系是世界衛(wèi)生組織(WHO)和我國(guó)生物制品規(guī)程推薦的人用疫苗生產(chǎn)細(xì)胞系,已成功應(yīng)用于包括流感疫苗在內(nèi)的多種疫苗的生產(chǎn),其安全性已得到充分認(rèn)證。

在疫苗生產(chǎn)過(guò)程中,為了獲得高滴度、高質(zhì)量的病毒液,需要高密度的細(xì)胞提供病毒復(fù)制的基質(zhì),為實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的高密度培養(yǎng),在體外培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)會(huì)添加一定量的血清,血清可提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需的必需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),如貼壁生長(zhǎng)因子、激素、微量元素、載體蛋白等。

使用血清也會(huì)有很多的不足:①血清容易引起細(xì)菌、真菌、病毒及支原體的污染,會(huì)增加疫苗生產(chǎn)的安全性隱患;②血清的質(zhì)量在批次間存在很大的差異,影響疫苗生產(chǎn)工藝的穩(wěn)定性和疫苗質(zhì)量控制;③血清成分復(fù)雜,含有多種蛋白質(zhì)、激素、生長(zhǎng)因子等,増加疫苗等產(chǎn)品連續(xù)純化過(guò)程的難度;④血清價(jià)格昂貴,在產(chǎn)品規(guī)模化生產(chǎn)時(shí)會(huì)増加放大成本;⑤血清中含有能促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)的物質(zhì),但也含有一些對(duì)細(xì)胞有毒性作用和抑制作用的物質(zhì),影響細(xì)胞的生長(zhǎng),血清使用造成的細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程和疫苗生產(chǎn)的安全性問(wèn)題及生產(chǎn)成本増加的問(wèn)題,成為動(dòng)物細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)技術(shù)研究和應(yīng)用的發(fā)展動(dòng)因,因此,基于細(xì)胞和產(chǎn)品特性的無(wú)血清培養(yǎng)基研制己成為細(xì)胞工程領(lǐng)域的重要課題。

例如:HiMedia公司生產(chǎn)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基SFRE系列,是基礎(chǔ)培養(yǎng)基M199的改良款,該系列分為SFRE199-1和SFRE199-2,可用于培養(yǎng)Vero細(xì)胞。與M199相比主要區(qū)別是提高了葡萄糖和氨基酸的濃度,降低了硝酸鐵、黃嘌呤和碳酸氫鈉的濃度。另外加入硫酸鋅、丙酮酸鈉和魚(yú)精蛋白鋅胰島素。

 

SFRE 199-1有Hank's鹽;SFRE 199-2含有Earle's鹽,兩款均不含胰島素,需要使用前自行添加??蔁o(wú)血清培養(yǎng),與加胎牛血清的常規(guī)培養(yǎng)基比較,細(xì)胞生長(zhǎng)速率、產(chǎn)量和蛋白容量均相同,均在移植后第6天單層細(xì)胞達(dá)到充分融合。

 

締一生物作為HiMedia公司在中國(guó)的代理商,在細(xì)胞培養(yǎng)、微生物培養(yǎng)和檢測(cè)領(lǐng)域,一如既往地為您帶來(lái)的服務(wù)。

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