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細(xì)胞體外培養(yǎng)應(yīng)注意的方面

更新時(shí)間:2019-05-30  |  點(diǎn)擊率:2613

細(xì)胞培養(yǎng)是很重要的一門技術(shù)。其培養(yǎng)效果受到多方面影響,可匯總?cè)缦拢?/span>

 

1、溫度。細(xì)胞生長(zhǎng)需要適宜的溫度。通常來說,人和哺乳動(dòng)物的細(xì)胞培養(yǎng)溫度要在35-37℃,鳥類細(xì)胞培養(yǎng)在38.5℃較好,鼠類細(xì)胞在34℃適宜生長(zhǎng)。細(xì)胞對(duì)低溫的耐受力比高溫強(qiáng)。

 

2、分離方法

常用的分離方法有組織塊分離法和酶消化分離法。也有使用抗體或磁珠包被的抗體分離細(xì)胞。

 

3、培養(yǎng)液

1)血清:細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)血清的濃度要控制在5%~20%,過高或過低的血清濃度都不利于細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖。當(dāng)然,也可以使用特別配制的商品化的無血清培養(yǎng)基。

 

2)激素和生長(zhǎng)因子:不同的細(xì)胞需要不同的激素和因子。常見有:雌二醇、孕酮、表皮生長(zhǎng)因子、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子。許多激素和因子對(duì)細(xì)胞有促增殖、分化作用。

 

3)抗生素:常用的抗菌素是青霉素和鏈霉素。此外,卡那霉素、新霉素、兩性霉素、氯霉素、潮霉素都可以防止細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)菌和真菌的感染。

 

4)支持物:有些貼壁細(xì)胞需要特定的支持物。常見的支持物有滋養(yǎng)細(xì)胞或生長(zhǎng)基質(zhì)(如膠原等)。

 

4、接種的細(xì)胞密度:細(xì)胞密度過高和過低均不利于細(xì)胞生長(zhǎng)。

 

培養(yǎng)液的pH值:不同種動(dòng)物或是同一種動(dòng)物的不同部位對(duì)pH的要求各不相同。一般情況下,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的pH值一般在7.2-7.4。除文獻(xiàn)報(bào)道外,自己也可進(jìn)行摸索。如培養(yǎng)瓶蓋已松口,與外界氣體存在交換,培養(yǎng)箱內(nèi)的CO2濃度以及培養(yǎng)液中的緩沖鹽成分及濃度也可影響培養(yǎng)液的pH值。

 

品名:Ausbian精制新生牛血清

貨號(hào):VS500N

批號(hào):1712A

規(guī)格:500ml/瓶

市場(chǎng)價(jià):1600元

歡樂價(jià):800元

*活動(dòng):買10瓶送3瓶,100瓶送40瓶

 

上海締一生物提供的Ausbian精制新生牛血清(γ照射),是在新西蘭政府獸醫(yī)管理局監(jiān)管下的出口注冊(cè)屠宰場(chǎng)采集的。血清經(jīng)過0.22微米過濾和15kGy的gamma射線照射,減少了存在微生物的風(fēng)險(xiǎn)。同時(shí)檢測(cè)過細(xì)胞毒效應(yīng),確保沒有病毒。在病毒分離方面,均未檢出BVD(牛病毒性腹瀉病毒) 、PI-3(牛副流感病毒3型)、IBR(牛傳染性鼻氣管炎) ,質(zhì)量有保證,且價(jià)格正在優(yōu)惠期。

 

參考文獻(xiàn)

黃蘭蘭,等. 影響動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)因素. 黑龍江動(dòng)物繁殖. 2005,13(4):16-19

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