萬(wàn)古霉素是一種抗生素，通過(guò)干擾細(xì)菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)中的肽聚糖來(lái)干擾細(xì)胞壁的合成，抑制細(xì)胞壁中磷脂和多肽的生成，以抑制細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖。

耐萬(wàn)古霉素腸球菌（Vancomycin-Resistant Enterococcus，簡(jiǎn)稱(chēng)VRE），是腸球菌屬下的一種細(xì)菌，有著對(duì)萬(wàn)古霉素這種抗生素的抗藥性。主要分布在哺乳動(dòng)物腸內(nèi)、消化道和尿道中（1）。VRE感染多發(fā)生于免疫力低下者，癌癥、肝硬化、幔性腎炎尿毒癥、腦梗死等重癥住院患者,主要造成肺部、腹腔、血液、手術(shù)傷口、泌尿道感染，致死率很高（2）。

腸球菌感染作為一種引起醫(yī)院感染的主要致病菌，已經(jīng)引起醫(yī)學(xué)界的廣泛關(guān)注。例如我國(guó)在1986年就開(kāi)始對(duì)全國(guó)醫(yī)院中的對(duì)耐藥葡萄球菌和耐萬(wàn)古霉素腸球菌進(jìn)行監(jiān)測(cè)；2015年修訂《臨床抗菌藥物合理應(yīng)用指導(dǎo)原則》等。為降低VRE感染風(fēng)險(xiǎn)，提高VRE菌檢率，加強(qiáng)對(duì)耐藥菌的監(jiān)測(cè)，尤其對(duì)易感人群耐藥菌的監(jiān)測(cè)非常重要。

HiMedia公司的HiCrome系列培養(yǎng)基產(chǎn)品，操作便捷，更加環(huán)保，特異性和靈敏度高，準(zhǔn)確率達(dá)99%，價(jià)格更低且貨期穩(wěn)定。

HiCrome耐萬(wàn)古霉素腸球菌顯色培養(yǎng)基（貨號(hào)：M1830，品名：HiCrome VRE Agar Base）

用于從臨床樣本中鑒定耐萬(wàn)古霉素腸球菌。例如，M1830曾被用于研究護(hù)士白大衣中的VRE細(xì)菌污染（3）。

VRE通常在醫(yī)院和慢病護(hù)理機(jī)構(gòu)中傳播，例如對(duì)患者的糞便鏡下計(jì)數(shù)會(huì)導(dǎo)致醫(yī)院環(huán)境的污染和傳染。傳統(tǒng)已有許多培養(yǎng)基用于檢測(cè)VRE，如耐萬(wàn)古霉素腸球菌基礎(chǔ)肉湯或瓊脂，或者是添加萬(wàn)古霉素的膽汁七葉苷瓊脂。

M1830培養(yǎng)基中的特別蛋白胨提供氮源和碳源化合物、長(zhǎng)鏈氨基酸、維生素和其他生長(zhǎng)所需的必要營(yíng)養(yǎng)；氯化鈉維持滲透壓平衡；緩沖鹽提供緩沖系統(tǒng)；添加劑可選擇性分離耐萬(wàn)古霉素的腸球菌。

加入添加劑（FD277），35-37℃培養(yǎng)24-48小時(shí)后，耐萬(wàn)古霉素糞腸球菌接種量為50-100CFU，在培養(yǎng)基上旺盛生長(zhǎng)，裂解培養(yǎng)基中的顯色底物，產(chǎn)生藍(lán)綠色菌落，在不透明的凝膠背景下十分清晰（圖1），且回收率≥50％. 糞腸球菌和金黃色葡萄球菌接種量均＞10³CFU，生長(zhǎng)受到抑制，回收率為0％.

圖1：M1830，耐萬(wàn)古霉素糞腸球菌落呈藍(lán)綠色。

HiCrome第二代耐萬(wàn)古霉素腸球菌顯色培養(yǎng)基（貨號(hào)：M1925 ，品名：HiCrome VRE Agar Base, Modified）推薦用于從臨床樣本中選擇性分離和鑒別耐萬(wàn)古霉素的糞腸球菌和屎腸球菌。

M1925中的特別蛋白胨提供微生物生長(zhǎng)必要的養(yǎng)分和維生素；氯化鈉維持滲透壓平衡；酚紅為pH指示劑，阿拉伯糖為發(fā)酵糖。添加劑（FD277）用于選擇性分離耐萬(wàn)古霉素的腸球菌。

35-37℃培養(yǎng)24-48小時(shí)后，由于腸球菌屬含葡萄糖苷酶，可裂解培養(yǎng)基中的顯色底物，產(chǎn)生藍(lán)色菌落；屎腸球菌發(fā)酵阿拉伯糖，裂解顯色底物，產(chǎn)生綠色菌落和黃色背景。（圖2）

其中，耐萬(wàn)古霉素糞腸球菌（VRE）與耐萬(wàn)古霉素屎腸球菌（VRE）接種量分別為50-100CFU，生長(zhǎng)旺盛且回收率≥50％.糞腸球菌和金黃色葡萄球菌接種量均＞10³CFU，生長(zhǎng)受到抑制，回收率為0％.

圖2：M1925，左側(cè)：耐萬(wàn)古霉素屎腸球菌為綠色菌落，右側(cè)：耐萬(wàn)古霉素糞腸球菌成藍(lán)綠色菌落

以上兩款培養(yǎng)基可直接用來(lái)自篩查拭子的菌液接種。應(yīng)將分離的菌落制備為液體菌液，其濁度大約為0.5 McFarland單位。

參考文獻(xiàn)：

1. Mara D.,Horan NJ: The Handbook of water, wasterwater and microbiology. Amsterdam, The Netherlands, Academic Press;2003

2. Mascini EM, Bonten MJ: Vancomycin-resistant enterococci: consequences for therapy and infection control. Clin Microbiol Infect. 2005, 11(Suppl.4):43-56

3.Priyanka Gupta MSc, Nilanjana Bairagi PhD , Richa Priyadarshini PhD.Bacterial contamination of nurses' white coats after first and second shift. American Journal of Infection Control[J]. 2017,45(1): 86-88.

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