日本筑波-染色體形式的DNA是生命的基本組成部分，這已不是什么秘密。細(xì)胞分裂過(guò)程中染色體的不正確分布會(huì)帶來(lái)災(zāi)難性的后果。不平衡的染色體拷貝或非整倍性是腫瘤的標(biāo)志，并影響包括人類(lèi)在內(nèi)的所有生物的發(fā)育和存活。

 

細(xì)胞如何傳播遺傳物質(zhì)已經(jīng)使研究人員著迷了幾個(gè)世紀(jì)。在2020年6月發(fā)表于《核酸研究》上的一項(xiàng)研究中，筑波大學(xué)的研究人員在木村敬二副教授的帶領(lǐng)下，確定了一種新的蛋白質(zhì)復(fù)合體NWC，它參與了染色體的分布。

NWC與核仁(一種無(wú)膜的核內(nèi)結(jié)構(gòu))相關(guān)，并在細(xì)胞分裂過(guò)程中重新定位到染色體的外圍。這種蛋白質(zhì)復(fù)合物包含三種不同的蛋白質(zhì)：1，WDR43和Cirhin。1通常與核仁相關(guān)，而WDR43和Cirhin是WD重復(fù)蛋白。木村副教授說(shuō)：“這項(xiàng)研究很重要，因?yàn)槠駷橹?，核仁蛋白的有絲分裂功能尚未得到充分表征。”

該團(tuán)隊(duì)使用免疫熒光技術(shù)檢測(cè)了1在人細(xì)胞中的定位。使用專(zhuān)門(mén)的顯微鏡，蛋白質(zhì)的位置可以通過(guò)其“發(fā)光”顯示出來(lái)。他們發(fā)現(xiàn)，1在有絲分裂或核分裂過(guò)程中位于染色體的外圍。木村副教授解釋說(shuō)：“當(dāng)我們檢查1蛋白時(shí)，我們意識(shí)到它沒(méi)有任何功能性基序。然后，我們探索了它可能與其他蛋白復(fù)合的功能。”

使用先進(jìn)的分子技術(shù)，研究團(tuán)隊(duì)確定了NWC復(fù)合物并對(duì)其進(jìn)行了表征。他們檢查了從復(fù)合物中去除單個(gè)蛋白質(zhì)的效果，發(fā)現(xiàn)NWC定位于染色體并在有絲分裂中起作用需要所有三個(gè)組件。減少細(xì)胞中NWC的量會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞周期進(jìn)程不*，從而導(dǎo)致染色體無(wú)法分離，錯(cuò)位，以及準(zhǔn)確的染色體分布所需的蛋白質(zhì)的位置和濃度存在缺陷，包括Aurora B，粘著蛋白復(fù)合物和組蛋白H3磷酸化。

Kimura副教授及其同事提出的結(jié)果表明，NWC通過(guò)允許Aurora B在著絲粒處積累(部分通過(guò)調(diào)節(jié)組蛋白磷酸化)而在有絲分裂染色體穩(wěn)定性中發(fā)揮特定作用。NWC如何控制著絲粒附近的組蛋白磷酸化仍有待確定。

鑒于正確的染色體傳播對(duì)于生命和疾病的預(yù)防至關(guān)重要，因此這些結(jié)果可能會(huì)成為尋找基因的新焦點(diǎn)，這些基因突變后會(huì)導(dǎo)致非整倍性或染色體拷貝失衡。

血清的熱滅活是很多培養(yǎng)者感興趣的話(huà)題，價(jià)格不菲的血清中含有諸如生長(zhǎng)因子，維生素，氨基酸等珍貴物質(zhì)，而將它們置于50℃以上的溫度長(zhǎng)達(dá)30分鐘是*沒(méi)有必要的。盡管如此，在大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室之中血清的熱滅活還是作為常規(guī)來(lái)執(zhí)行，多數(shù)實(shí)驗(yàn)者并沒(méi)有考慮熱處理對(duì)血清中的生長(zhǎng)因子、氨基酸等成分帶來(lái)的負(fù)面影響，在我們的技術(shù)熱線中常常被提到的就是“是否該對(duì)血清進(jìn)行熱滅活”，下面我們就對(duì)胎牛血清的熱滅活進(jìn)行一些探討和解釋。

 

血清熱滅活操作步驟

編輯

①選用與血清瓶同規(guī)格的對(duì)照瓶一個(gè)。

②對(duì)照瓶?jī)?nèi)放入與血清等體積的水。

③溫度預(yù)試。

對(duì)照瓶?jī)?nèi)插入2—3支經(jīng)挑選的溫度計(jì)(保證測(cè)試溫度的準(zhǔn)確性)，放入水浴箱中，接通電源，調(diào)節(jié)溫度控制鈕，使水浴箱溫度所示溫度保持在56℃。

④血清滅活。

血清瓶與帶溫度計(jì)的對(duì)照瓶一齊放入水浴箱中，待溫度計(jì)所示溫度上升至56℃時(shí)， 定時(shí)30分鐘。

⑤大瓶血清滅活后，進(jìn)行分裝。

⑥保存。

分裝后，抽樣做無(wú)菌試驗(yàn)，－20～－70℃保存。