av一区二区三区不卡在线看,精品国精品国产应用久,精品欧美一区二区三区精品久久,久久久久久久久欧美精品

當(dāng)前位置:首頁  >  技術(shù)文章  >  細(xì)胞培養(yǎng)的基本步驟有哪些?

細(xì)胞培養(yǎng)的基本步驟有哪些?

更新時間:2022-08-10  |  點(diǎn)擊率:662

細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指的是細(xì)胞在體外條件下的生長,在培養(yǎng)的過程中細(xì)胞不再形成組織(動物)。培養(yǎng)物是單個細(xì)胞或細(xì)胞群。細(xì)胞在培養(yǎng)時都要生活在人工環(huán)境中,由于環(huán)境的改變,細(xì)胞的移動或受一些其他因素的影響,培養(yǎng)時間加長,傳代導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)單一化型。

一、細(xì)胞復(fù)蘇

將凍存細(xì)2113胞從液氮5261中取出后,在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進(jìn)其融4102化。移人15ml離心管中,加入10ml預(yù)熱1653的DMEM*培養(yǎng)基,輕輕吹勻,離心,2000rpmX2min,棄上清液。

加入10mlDMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入10mlDMEM*培養(yǎng)基,輕輕吹打,接種于10cm盤中,在含5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

二、細(xì)胞傳代

細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時.去培養(yǎng)基,10mlPBS清洗2次。加入3ml含0.25%EDTA的胰蛋白酶,放人細(xì)胞培養(yǎng)箱3min。加人1mlDMEM*培養(yǎng)基終止胰酶消化,轉(zhuǎn)移至15ml離心管。

加入10mlPBS清洗細(xì)胞培養(yǎng)盤,轉(zhuǎn)移至15ml離心管,2000rpmX2min,棄上清液。再加入10mlPBS(經(jīng)高壓滅菌,保存于40C),吹勻,吸取10微升進(jìn)行計數(shù),按照1×106/盤接種,在含5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

三、細(xì)胞凍存

細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時,去培養(yǎng)基,10mlPBS清洗2次。加入3ml含0.25%EDTA的胰蛋白酶,放人細(xì)胞培養(yǎng)箱3min。加入lmlDMEM*培養(yǎng)基終止胰酶消化,轉(zhuǎn)移至15ml離心管。加入10mlPBS清洗細(xì)胞培養(yǎng)盤,轉(zhuǎn)移至15ml離心管,2000rpmX2min,棄上清液。

加入lml凍存液(90%血清,10%DMSO),放入凍存盒內(nèi)(盒內(nèi)有異丙醇,以保證溫度降低的速度),立即放入一80℃冰箱內(nèi),過夜,第二天放入液氮中,可以保存至少兩年,如不放人液氮,可以保存三個月。

凍存液的配制:70%的*培養(yǎng)基+20%FBS+10%DMSO.DMSO要慢慢滴加,邊滴邊搖。

科研實(shí)驗(yàn)中,細(xì)胞的體外培養(yǎng)一直是一個重要環(huán)節(jié)。細(xì)胞要養(yǎng)好,就要用好血清,如Ausbian®特級胎牛血清,它適合各種細(xì)胞培養(yǎng),尤其適合難養(yǎng)細(xì)胞,如:干細(xì)胞、肝細(xì)胞,神經(jīng)細(xì)胞,原代培養(yǎng)、細(xì)胞融合、轉(zhuǎn)染細(xì)胞等


亚洲一区二区少妇激情-国产精品美女久久高潮| 人妻日韩精品中文字幕图片-麻豆极度性感诱人在线露脸| 日韩精品人妻系列一区-亚洲女同性一区二区三区| 午夜福利卫生纸福利院-一区二区三区久久亚洲| 国产精品久久久精品一区-99久久免费精品国产男女性高好| 国产欧美日韩精品一区在线-久久精品视频免费获取地址| 日本少妇激情一区二区-亚洲自偷自拍熟女另类蜜臀| 国产剧情av中文字幕-五月婷婷在线手机视频| 日韩中文字幕v亚洲中文字幕-日韩亚洲av免费在线观看| 亚洲视频一区二区三区免费-国产一级黄色大片在线| 日本亚洲精品中字幕日产2020-很黄很黄的裸交视频网站| 久久免费观看归女高潮特黄-黄色av一本二本在线观看| 日韩国产一区二区三区在线-精品日韩人妻少妇av| 国产精品电影在线一区-亚洲国产大片一区二区官网| 黄色美女网站大全中文字幕-欧美韩国日本一区二区| 亚洲综合av一区二区三区-高潮又爽又黄无遮挡激情视频| 国产一区二区无套内射-国内精品久久久久久久齐pp| 婷婷人妻少妇激情在线-欧美日韩人体艺术一区二区| 国产精品电影在线一区-亚洲国产大片一区二区官网| 国产欧美日韩精品一区在线-久久精品视频免费获取地址| 亚洲精品一区网站在线观看-黄页视频免费观看网站| 欧美mv日韩mv视频-熟妇人妻ⅴa精品中文| 国产亚洲欧美一区91-亚洲欧美一区二区在线| 国产精品久久99精品毛片-国产四季高清一区二区三区| 日韩av电影一区二区网址-老熟妇仑乱视频一区二| sobo欧美在线视频-免费av网址一区二区| 欧美mv日韩mv视频-熟妇人妻ⅴa精品中文| 性都花花世界亚洲综合-日韩av一区二区三区| 熟女少妇免费一区二区-麻豆一区二区三区免费在线观看| 免费看黄色污污的网站-欧美一区二区三区爽爽| 亚洲视频一区二区三区免费-国产一级黄色大片在线| 午夜精品午夜福利在线-内射无套内射国产精品视频| 亚洲福利视频免费观看-中文字幕日本不卡一区二区| 欧美伦乱淫老妇女激情吧-亚洲女邻居精品二区久久| 丝袜美腿人妻连续中出-在线观看日韩三级视频| 日本女优一卡二卡在线观看-欧美大胆a级视频秒播| 国产亚洲欧美一区91-亚洲欧美一区二区在线| 色噜噜噜噜一区二区三区-欧美最猛黑人做爰视频| 亚洲欧美一区二区中文-台湾中文综合网妹子网| 国产aa视频一区二区三区-国产精品久久久久久久毛片动漫| 91精品国产影片一区二区三区-欧美精品久久久精品一区二区|