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定位于活神經(jīng)元的細(xì)胞外表層膜,Ausbian胎牛血清助力細(xì)胞學(xué)研究

更新時(shí)間:2023-08-13  |  點(diǎn)擊率:501

細(xì)胞學(xué)研究經(jīng)常會(huì)添加胎牛血清,為細(xì)胞提供合適的營養(yǎng)成分。Ausbian進(jìn)口胎牛血清,內(nèi)毒素含量低,多批次平行供應(yīng),全程冷鏈運(yùn)輸。

 

多細(xì)胞生物系統(tǒng)顯示出高度復(fù)雜的結(jié)構(gòu)和組織特性,這對(duì)尋求在不引起損傷的情況下,實(shí)現(xiàn)細(xì)胞特異性生物界面的研究人員提出了挑戰(zhàn)。

 

例如,人類大腦包含約860億個(gè)神經(jīng)元和超過100萬億個(gè)突觸連接,這些突觸連接對(duì)神經(jīng)元之間的交流很重要,但是盡管幾十年來人們一直在努力將生物電子設(shè)備縮小到納米級(jí),并擴(kuò)大制造工藝,但目前,為大腦設(shè)計(jì)的設(shè)備通常一次只能與數(shù)百個(gè)細(xì)胞接口,并且無法實(shí)現(xiàn)細(xì)胞類型特異性與組織的整合。解決這一問題的另一種方法是,在完整的生物系統(tǒng)中對(duì)特定細(xì)胞進(jìn)行遺傳編程,以原位構(gòu)建具有所需形式和功能的人工結(jié)構(gòu)。

 

之前的研究表明,導(dǎo)電聚合物可以通過電化學(xué)聚合直接在活組織的細(xì)胞上合成,也可以在具有天然氧化環(huán)境或氧化酶的生物體和組織中合成。然而,這些方法都無法實(shí)現(xiàn)細(xì)胞特異性的關(guān)鍵目標(biāo)。已有的研究顯示,科學(xué)家們推出了基因靶向化學(xué)組裝(GTCA)方法,該方法使用細(xì)胞特異性遺傳信息來引導(dǎo)神經(jīng)元啟動(dòng)具有各種導(dǎo)電特性的聚合物材料的原位沉積。具體來說,抗壞血酸過氧化物酶Apex2作為催化劑在神經(jīng)元中表達(dá),并用于引發(fā)過氧化氫(H2O2)激活的導(dǎo)電聚合物或絕緣聚合物的氧化聚合。電生理和行為分析證實(shí),功能聚合物的基因靶向組裝重塑了膜的特性,而不需要使用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物系,并成功地調(diào)節(jié)了自由移動(dòng)動(dòng)物的細(xì)胞類型特異性行為。

 

盡管取得了初步成功,但之前用于概念驗(yàn)證系統(tǒng)的程序顯示出一個(gè)主要限制:Apex2不是單獨(dú)針對(duì)質(zhì)膜的細(xì)胞外側(cè),而且大部分Apex2保留在細(xì)胞內(nèi)。開發(fā)一種可以有效地將反應(yīng)中心放置在細(xì)胞外空間的工藝,在膜的外側(cè),對(duì)于創(chuàng)造這種生物制造平臺(tái)的進(jìn)一步應(yīng)用至關(guān)重要,原因如下。

 

首先,具有完整細(xì)胞膜的活細(xì)胞通常不會(huì)滲透到大的前體或材料中;因此,酶的膜顯示不足可能導(dǎo)致生命系統(tǒng)中化學(xué)組裝的低產(chǎn)量。

 

其次,增加催化反應(yīng)的酶的數(shù)量(利用細(xì)胞外空間)可以降低設(shè)定反應(yīng)條件的重要試劑(H2O2)的濃度,從而提高生物相容性。

 

第三,細(xì)胞外空間的局部反應(yīng)可能限制對(duì)細(xì)胞內(nèi)天然化學(xué)的不利影響;先前的報(bào)道表明,某些細(xì)胞內(nèi)聚合反應(yīng)可能對(duì)細(xì)胞有毒,并可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。

 

最后,除了膜定位之外,還存在許多其他的方法來推進(jìn)技術(shù)的發(fā)展;例如,Apex2沒有針對(duì)細(xì)胞表面的應(yīng)用程序進(jìn)行優(yōu)化。另一種表征良好的過氧化物酶,辣根過氧化物酶(HRP),催化與Apex2相同的反應(yīng),具有更快的動(dòng)力學(xué)和更強(qiáng)的抗h2o2誘導(dǎo)的失活能力。

 

近日,一項(xiàng)發(fā)表在《Science Advances》上,標(biāo)題為:“Genetically targeted chemical assembly of polymers specifically localized extracellularly to surface membranes of living neurons"。

 

科學(xué)家們提出了下一代GTCA,用于靶向聚合物組裝,HRP高度定位于初級(jí)神經(jīng)元的質(zhì)膜上,細(xì)胞內(nèi)保留最小。通過這種方法在細(xì)胞外合成的聚合物在感興趣的活神經(jīng)元膜周圍形成密集的簇,并且神經(jīng)元在急性聚合后仍能存活。最后,這種膜定位方法被證明很容易適用于錨定其他蛋白質(zhì),從而可以探索多種替代的GTCA策略。


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