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保障細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)順的關(guān)鍵要點(diǎn):如何進(jìn)行前期準(zhǔn)備

更新時(shí)間:2023-09-25  |  點(diǎn)擊率:654

工欲善其事,必先利其器。想要做好細(xì)胞實(shí)驗(yàn),前期的準(zhǔn)備很重要。

 

1、選擇正確的培養(yǎng)基

 

在養(yǎng)細(xì)胞之前,就要了解,你所養(yǎng)細(xì)胞的來(lái)源以及種類和名稱。

 

選擇正規(guī)途徑來(lái)源的細(xì)胞,索取細(xì)胞培養(yǎng)條件,并查閱文獻(xiàn),確定所需培養(yǎng)液種類以及是否需要添加特殊成分,常用的細(xì)胞培養(yǎng)液有DMEM、RPMI1640、F12等等,一些常見(jiàn)的細(xì)胞基本可以使用這幾種培養(yǎng)基中的一種來(lái)培養(yǎng),有的需要加入一定其他成分,這需要根據(jù)不同的細(xì)胞類型,查ATCC細(xì)胞庫(kù)或者查文獻(xiàn),才能找到所需最佳培養(yǎng)液。選擇正確的培養(yǎng)液是養(yǎng)好細(xì)胞的第一步。

 

2、了解細(xì)胞的生長(zhǎng)習(xí)性

 

不同的細(xì)胞生長(zhǎng)習(xí)性不同。如成纖維細(xì)胞是貼壁生長(zhǎng),有一定的密度依賴性,密度小可能會(huì)出現(xiàn)不增殖,狀態(tài)差的情況,接種密度大時(shí)則需要隔天傳代,頻繁傳代則影響細(xì)胞狀態(tài);再如RPMI-8226人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞,是懸浮生長(zhǎng)的,傳代需離心棄去上清即可??傊?,了解細(xì)胞生長(zhǎng)習(xí)性,再加上正確的計(jì)數(shù),才能掌握好傳代的密度。

 

3、準(zhǔn)備無(wú)菌環(huán)境

 

千里之堤潰于蟻穴,細(xì)菌、真菌、支原體等微生物的生長(zhǎng)速度塊和破壞力強(qiáng),會(huì)破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。使用紫外線照射、定期用專用試劑進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室清潔等,都有助于降低細(xì)胞污染的風(fēng)險(xiǎn)。

 

4、選擇優(yōu)質(zhì)的血清

 

血清中含有細(xì)胞生長(zhǎng)所必須的生長(zhǎng)因子,作為哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的附加物,血清的添加是十分重要的,因此,選擇優(yōu)質(zhì)的血清,是細(xì)胞培養(yǎng)成功與否的關(guān)鍵!Ausbian進(jìn)口胎牛血清,內(nèi)毒素含量低,澳洲血源,全程冷鏈運(yùn)輸,為細(xì)胞培養(yǎng)保駕護(hù)航。

 


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