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『Ausbian進(jìn)口胎牛血清』助力CD11與pre - mRNA剪接調(diào)節(jié)研究取得新進(jìn)展

更新時(shí)間:2023-12-30  |  點(diǎn)擊率:440

細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶(CDKs),是一個(gè)絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶大家族,調(diào)節(jié)從轉(zhuǎn)錄、mRNA前加工到細(xì)胞周期的基本細(xì)胞過(guò)程。CDK通常通過(guò)與其同源周期蛋白伴侶的異二聚化激活。由于它們?cè)谡{(diào)節(jié)細(xì)胞增殖和藥物性質(zhì)方面的重要作用,小分子抑制劑已經(jīng)開(kāi)發(fā)用于癌癥治療的純化活化CDK復(fù)合物。

 

CDK11(也稱(chēng)為CDC2L2)與細(xì)胞周期蛋白L1或細(xì)胞周期蛋白L2一起在基因調(diào)控中起作用。人類(lèi)CDK11由兩個(gè)高度相似的基因CDK11ACDK11B編碼。在發(fā)現(xiàn)CDK11后不久,CDK11在體內(nèi)和體外都參與了特定底物pre - mRNA剪接的調(diào)控。與這一作用一致,CDK11被證明與剪接因子相互作用和/或磷酸化,如RNPS19G8。最近,有報(bào)道稱(chēng)CDK11通過(guò)SF3B1的磷酸化在全局內(nèi)含子去除中起關(guān)鍵作用,SF3B1是一種識(shí)別分支點(diǎn)序列的U2小核糖核蛋白(snRNP)成分,用于剪接體激活。與其在剪接中的作用一致,CDK11定位于核斑點(diǎn),這是一種動(dòng)態(tài)的亞核結(jié)構(gòu),用于剪接因子的儲(chǔ)存和修飾。

 

除了剪接作用外,CDK11還磷酸化RNA聚合酶II C末端結(jié)構(gòu)域(CTD)2號(hào)和5號(hào)絲氨酸,表明其參與轉(zhuǎn)錄調(diào)控。它還調(diào)節(jié)特定pre - mRNA3 '加工。例如,CDK11通過(guò)3 '加工因子FLASH被招募到依賴復(fù)制的組蛋白mRNA上,促進(jìn)它們的3 '切割。同樣,CDK11被轉(zhuǎn)錄/輸出復(fù)合體TREX募集到HIV DNA上,通過(guò)促進(jìn)切割因子的結(jié)合來(lái)增強(qiáng)病毒RNA3 '加工。

 

除了在整個(gè)細(xì)胞周期中普遍表達(dá)的全長(zhǎng)CDK11外,N端截?cái)嗟?span>CDK11蛋白異構(gòu)體(P58)G2/M期通過(guò)內(nèi)部核糖體進(jìn)入位點(diǎn)特異性翻譯,并且是有絲分裂進(jìn)程所必需的。與CDK11在基因調(diào)控和細(xì)胞周期控制中的重要作用一致,CDK11是正常細(xì)胞和幾種類(lèi)型癌細(xì)胞增殖所必需的,并已成為癌癥治療的一個(gè)有希望的靶點(diǎn)。然而,活性CDK11復(fù)合物的調(diào)控機(jī)制和組成仍然知之甚少。

 

SAP30BP是一種特性有限的蛋白。它最初被鑒定為一種由單純皰疹病毒1(HSV‐1)誘導(dǎo)的蛋白,并與轉(zhuǎn)錄輔酶抑制因子mSin3A的一個(gè)組分SAP30相互作用。在這項(xiàng)研究中,科研人員發(fā)現(xiàn),在人類(lèi)細(xì)胞中,CDK11與細(xì)胞周期蛋白L1/L2SAP30BP形成緊密結(jié)合的復(fù)合物。利用高效的降解系統(tǒng),研究發(fā)現(xiàn)SAP30BP在全球pre - mRNA剪接中發(fā)揮類(lèi)似于CDK11的作用。

 

此外,通過(guò)確保細(xì)胞周期蛋白L1/L2CDK11的穩(wěn)定性和組裝,證明了SAP30BP在體內(nèi)和體外激活CDK11。總之,SAP30BP作為CDK11的重要激活因子,并共同調(diào)節(jié)全局pre - mRNA剪接。

 

本研究中,針對(duì)HeLaHAP1兩種細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),用到了Ausbian進(jìn)口特級(jí)胎牛血清。


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