av一区二区三区不卡在线看,精品国精品国产应用久,精品欧美一区二区三区精品久久,久久久久久久久欧美精品

當(dāng)前位置:首頁  >  技術(shù)文章  >  維生素B12測定培養(yǎng)基

維生素B12測定培養(yǎng)基

更新時間:2018-05-08  |  點擊率:1919

原理

乳酸桿菌生長需要特別的營養(yǎng),因而在非選擇性培養(yǎng)基上很難生長。維生素測定用培養(yǎng)基用于維生素的微生物法測定。該方法需要三種培養(yǎng)基:即維持培養(yǎng)基,用于保持菌種活力;接種培養(yǎng)基,用于測試菌液的制備;測定用培養(yǎng)基,用于待測維生素的定量。

維生素B12測定用培養(yǎng)基                        

 

貨號

品名

規(guī)格

儲存條件

保質(zhì)期

M036

Vitamin B12 Assay Medium

100G

8°C下密閉保存,理想是放置于干燥器中。

使用新鮮配置的培養(yǎng)基。干粉見標(biāo)簽有效期。

 

維生素B12測定用培養(yǎng)基,不含維生素B12,但包含所有其他維生素和必要養(yǎng)分,用于萊士曼乳酸桿菌(ATCC 7830)的生長。萊士曼乳酸桿菌(ATCC 7830)作為測定用菌,zui早由Capp等人描述(1)并被美國藥典和美國分析化學(xué)家協(xié)會(AOAC)所推薦(2,3)。

 

用已知稀釋度的維生素B12標(biāo)準(zhǔn)品,可以制備標(biāo)準(zhǔn)曲線(2,3)。

 

測試菌液的制備是將將活化后的菌株接種到乳酸桿菌肉湯培養(yǎng)基中,推薦在37°C 孵育24 小時,再離心、清洗、重懸于10 ml 生理鹽水中,再通過濁度分析或酸度分析,確定生長反應(yīng)。

 

  用維生素B12的濃度及對應(yīng)的吸光度制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。用標(biāo)準(zhǔn)曲線可確定待測樣本中的維生素B12的濃度。

 

應(yīng)非常小心地避免培養(yǎng)基和玻璃器具的污染。應(yīng)使用潔凈的無去污劑的玻璃器具。少量的外源物質(zhì)的污染可能導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。

 

用于接種的測定菌應(yīng)在的培養(yǎng)基中培養(yǎng)。

 

應(yīng)用

 

維生素B12測定用培養(yǎng)基推薦采用萊士曼氏乳酸桿菌(ATCC 7830)作為測定用菌,進行維生素B12的微生物法測定。

 

 

培養(yǎng)基組分

 

成分                                     克/升

無維生素酸水解酪蛋白                 15.000

葡萄糖                               40.000

天門冬酰胺                           0.200

醋酸鈉                               20.000

抗壞血酸                             4.000

L-胱氨酸                             0.400

DL-色氨酸                            0.400

硫酸腺嘌呤                           0.020

尿嘧啶                               0.020

黃嘌呤                               0.020

核黃素(維生素B2)                   0.001

鹽酸硫胺素                           0.001

生物素                               0.00001

煙酸                                 0.002

對氨基苯甲酸(PABA)                0.002

泛酸鈣                               0.001

鹽酸吡哆醇                           0.004

鹽酸吡哆醛                           0.004

鹽酸吡哆胺                           0.0008

葉酸                                 0.0002

磷酸二氫鉀                           1.000

磷酸氫二鉀                           1.000

硫酸鎂                               0.400

氯化鈉                               0.020

硫酸亞鐵                             0.020

硫酸錳                               0.020

聚山梨酯80                           2.000

鹽酸鳥嘌呤                           0.020

zui終pH值 (25°C)                     6.1±0.2

 

 

質(zhì)量控制

 

Ø外觀——奶油色至黃色,具均勻性,傾向形成可容易分解成粉末狀的軟塊

Ø制備好的培養(yǎng)基顏色和透明度——淡琥珀色透明溶液,可能有輕微沉淀

Ø配比濃度——在25°C下8.5%w/v(8.5g/100ml水)水溶液,pH值為6.1±0.2

ØpH值——5.90-6.30

 

配置

 

稱取8.45g干粉培養(yǎng)基溶于100ml蒸餾水,必要時加熱使培養(yǎng)基*溶解?;靹?,使輕微的沉淀均勻分布。測定時,分裝試管,每管為5ml培養(yǎng)基(包含標(biāo)準(zhǔn)品和待測樣品)。加蒸餾水,使總體積達到10ml。高壓消毒15磅121°C 5分鐘。立即冷卻培養(yǎng)基。每個試管(10 ml)的維生素B12水平為0、0.025、0.05、0.075、0.1、0.125、0.15、0.2 ng時,均可獲得滿意結(jié)果。

 

培養(yǎng)反應(yīng)

 

進行微生物法測定維生素B12。采用萊士曼氏乳酸桿菌(ATCC 7830),35-37°C孵育18-24小時。

 

生長狀況

 

隨著測定管標(biāo)準(zhǔn)品水平升高,(美國藥典維生素B12標(biāo)準(zhǔn)水平,0,0.025,0.050,0.075,0.1,0.125,0.150,0.2ng),目標(biāo)菌生長逐漸遞增,伴隨著620nm處吸光度的增加。

 

文獻

 

1.  Capps B. E., Hobbs M. H. H. and Fox S. H., 1949, J. Biol. Chem., 178:517.

2. The United States Pharmacopoeia, 2006, USP29/NF24, The United States Pharmacopeial Convention, Rockville, MD.

3.  H. Williams, (Ed.), 2005, Official Methods of Analysis of the Association of Official Analytical Chemists, 19th Ed., AOAC,Washington, D.C

日韩精品人妻系列一区-亚洲女同性一区二区三区| 国产精品中出久久久蜜臀-久久久中国精品视频久久久| 久久精品国产96精品-日韩人成理论午夜福利| 18禁真人在线无遮挡羞免费-中文字幕精品一区二区三区四区| 亚洲另类自拍唯美另类-99国产精品兔免久久| mm在线精品视频在线观看-欧美国产日韩在线一区二区三区| 亚洲国产中文欧美一区二区三区-国产精品一区二区视频成人| 国产成人精品亚洲精品密奴-国产成人AV无码精品| 亚洲av专区在线观看国产-丰满人妻av一区二区三区| 中文字幕日韩精品不卡在线一区-国产tv日韩在线观看视频| av中文字幕男人天堂-懂色av一区二区三区在线观看| 婷婷人妻少妇激情在线-欧美日韩人体艺术一区二区| 日韩综合精品一区二区-丝袜美腿熟女人妻经典三级| 九九热这里只有精品九九-欧美日韩人妻精品一二三| 亚洲女人黄色录像一区-日韩av电影在线免费看| 亚洲欧美日韩二区三区-国产在线欧美一区日韩二区| 亚洲av综合av一区东京热-黄页免费视频网站在线观看| 欧美日韩国产亚洲免费-肉体粗喘娇吟国产91| 午夜福利院免费在线观看-久久精品日产第一区二区三区画质| 亚洲日本一区二区三区黄色电形-中文字幕乱码免费熟女| 日韩二级视频在线观看-美女扒开奶罩露出奶子的视频网站| 欧美精品啪啪人妻一区二区-嫩草人妻舔舔羞羞一区二区三区| 国产一区二区三区噜噜-精品久久亚洲一区二区欧美| 亚洲欧洲成视频免费观看-国产福利一区二区在线观看| 亚洲一区二区少妇激情-国产精品美女久久高潮| mm在线精品视频在线观看-欧美国产日韩在线一区二区三区| 看肥婆女人黄色儿逼视频-秋霞电影一区二区三区四区| 国产一区二区三区噜噜-精品久久亚洲一区二区欧美| 国产欧美一区二区三区嗯嗯-欧美一区二区日本国产激情| 国产精品久久久精品一区-99久久免费精品国产男女性高好| 欧美日韩国产综合四区-爆操极品尤物熟妇14p| 午夜日韩精品在线视频-亚洲网老鸭窝男人的天堂| 在线视频成人一区二区-亚洲另类中文字幕在线| 天天干天天天天天天天-亚洲综合av在线三区| 久久人妻一区二区三区欧美-国内不卡的一区二区三区| 俄罗斯胖老太太黄色特级片-国产精品黑丝美腿美臀| 日韩欧美国产综合久久-国产精品一起草在线观看| 色综合色综合久久综合频道-埃及艳后黄版在线观看| 欧美日韩黑人在线播放-51在线精品免费视频观看| 欧美伦乱淫老妇女激情吧-亚洲女邻居精品二区久久| 亚洲国产精品一区二区av-日本一级黄色一区二区|