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研究雙歧桿菌的利器

更新時間:2019-05-09  |  點擊率:1504

雙歧桿菌是革蘭氏陽性有分叉的桿菌(Y型,如兩歧雙歧桿菌;也有V型,如嬰兒雙歧桿菌或短桿狀,如長雙歧桿菌)。它越來越得到人類的重視。它作為人類腸道的長期定居菌(在嬰兒中甚至為顯著優(yōu)勢菌),對人的生理作用起到不可忽視的影響,例如:它刺激機體的免疫反應,形成腸道屏障,阻止致病菌的入侵,合成人體所需的維生素等。雙歧桿菌制劑常用于治療菌群失調、腹瀉、幽門螺桿菌陽性的消化道潰瘍等疾病。在酸奶中加入雙歧桿菌作為發(fā)酵菌種,其保健效果也大為提高。曾有的微生物學家指出:“光輝的抗生素之后的時代,將是活菌制劑的時代”。

 

鑒于雙歧桿菌的重要價值,我們常需要將雙歧桿菌同其他乳酸菌區(qū)別開來。現(xiàn)有的《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 雙歧桿菌檢驗》存在一定的局限,在鑒定方面,這個標準只適合食品中僅含有單一雙歧桿菌菌種的鑒定。在計數(shù)方面,它只適合食品中僅含有雙歧桿菌屬的計數(shù)。而在實際情況中,常常是多個菌屬混雜的情況。HiMedia開發(fā)的雙歧桿菌顯色培養(yǎng)基HiCrome™
Bifidobacterium Agar,可很好地將雙歧桿菌同乳桿菌區(qū)分開來。

 

該培養(yǎng)基除了含有必要的營養(yǎng)外,還含有牛奶蛋白,它有助于檢測酪蛋白水解反應。如有該反應,則菌落會有不透明光暈(短雙歧桿菌為該反應陽性);同時含有多種顯色劑,有助于鑒別乳桿菌和雙歧桿菌。乳桿菌菌落在該培養(yǎng)基上表現(xiàn)為綠色菌落和不透明光暈,嬰兒雙歧桿菌表現(xiàn)為深藍色至藍綠色菌落,短雙歧桿菌表現(xiàn)為粉紅色菌落,有不透明光暈(見下圖)。

 

 

HiMedia還提供有雙歧桿菌的生化鑒定試劑盒(貨號KB021),該試劑盒包含了12種生化試驗,為觸酶試驗、阿拉伯糖試驗、纖維二糖試驗、果糖試驗、乳糖試驗、麥芽糖試驗、甘露糖試驗、蜜二糖試驗、棉子糖試驗、蔗糖試驗、木糖試驗、水楊苷試驗。所調菌落可接種在5ml雙歧桿菌肉湯(M1395)中,35-37℃厭氧培養(yǎng)6-18小時,直到菌液濁度≥0.1OD(620nm)或0.5麥氏單位。然后無菌打開試劑盒,撕掉封條。在鑒定卡中每孔接種50μl菌液,35℃-37℃厭氧孵育24-48小時。孵育后,完成觸酶試驗,在第1孔用接種環(huán)在孔內培養(yǎng)基生長表面刮擦取樣,然后蘸到含3%H2O2溶液的干凈試管中。接種環(huán)表面冒泡為陽性反應。沒有冒泡為陰性反應。然后根據(jù)結果詮釋表和菌種標準表,完成菌種鑒定。該試劑盒一共可鑒定35種雙歧桿菌。

 

HiMedia公司還提供了一款雙歧桿菌選擇性計數(shù)瓊脂(貨號M1734),用于發(fā)酵乳和乳酸菌飲品中的雙歧桿菌計數(shù)。該培養(yǎng)基含有高純度的低聚半乳糖,很好的支持雙歧桿菌生長;同時含有鹽酸半胱氨酸,創(chuàng)造出雙歧生長所需的還原條件;而培養(yǎng)基中的莫匹羅星則抑制大多數(shù)的乳業(yè)所用的乳酸菌生長。用標準菌株證實,接種的50-100CFU雙歧桿菌能在該培養(yǎng)基中旺盛生長。

 

雙歧桿菌的鑒定有助于選育優(yōu)良的雙歧桿菌菌株,開發(fā)雙歧桿菌發(fā)酵飲品或制劑。在這方面,HiMedia的雙歧桿菌顯色培養(yǎng)基、生化鑒定試劑盒以及還可提供的雙歧桿菌選擇性計數(shù)瓊脂,無疑為研究人員和質檢人員對雙歧桿菌的分離、鑒定和計數(shù)提供了極大的便利。

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