av一区二区三区不卡在线看,精品国精品国产应用久,精品欧美一区二区三区精品久久,久久久久久久久欧美精品

當(dāng)前位置:首頁  >  技術(shù)文章  >  細(xì)胞被支原體污染后的清除辦法

細(xì)胞被支原體污染后的清除辦法

更新時(shí)間:2021-01-27  |  點(diǎn)擊率:1047

概述:在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,支原體感染發(fā)生率達(dá)到63%,因而細(xì)胞培養(yǎng)過程中被支原體污染是一個(gè)世界性的難題。本文締一生物為您分析細(xì)胞被支原體污染后的清除策略。

細(xì)胞培養(yǎng)中常遇見的有細(xì)菌污染、真菌污染、支原體污染、病毒污染等。

說起支原體污染,估計(jì)細(xì)胞培養(yǎng)的同學(xué)就開始犯愁了,細(xì)胞培養(yǎng)的老手都知道,支原體污染非常不易察覺。有的實(shí)驗(yàn)室被支原體污染后,如果不進(jìn)行有效*的支原體清除,該實(shí)驗(yàn)的細(xì)胞培養(yǎng)很難進(jìn)行下去,細(xì)胞傳代3代以后狀態(tài)就急劇下滑,無法進(jìn)行正常實(shí)驗(yàn),有的實(shí)驗(yàn)室甚至只能指望換細(xì)胞間。那么怎樣才能有效檢測并清除支原體污染呢?

支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)的污染、污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染、實(shí)驗(yàn)器材帶來的污染和用來制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。細(xì)胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個(gè)方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)操作;細(xì)胞培養(yǎng)和器材要保證無菌;在細(xì)胞培養(yǎng)中加入適量的抗生素。

1、支原體檢測

熒光定量PCR法(qPCR):是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上,將『針對(duì)支原體特異性保守序列的探針』做熒光標(biāo)記,使PCR擴(kuò)增后的產(chǎn)物帶有熒光,利用熒光信號(hào)的變化和配套軟件,進(jìn)行DNA擴(kuò)增反應(yīng)的實(shí)時(shí)監(jiān)測,簡稱qPCR。

優(yōu)點(diǎn):①靈敏度高、特異性強(qiáng)。

②時(shí)間短,2-3小時(shí)出結(jié)果。

③檢測結(jié)果可定量。

④操作簡便。

缺點(diǎn):①對(duì)于已做支原體滅活處理的樣品,由于支原體DNA仍舊存在其中,PCR結(jié)果會(huì)出現(xiàn)假陽性。(可用培養(yǎng)法做補(bǔ)充驗(yàn)證)

②不同廠家生產(chǎn)的試劑盒質(zhì)量差異巨大(由于引物及內(nèi)在設(shè)計(jì)不同),需謹(jǐn)慎選擇,盡量在專業(yè)人員推薦指導(dǎo)下使用。

德國MB公司生產(chǎn)的支原體qPCR檢測試劑盒(均為探針法檢測),依據(jù)操作步驟的細(xì)微差別,

分『經(jīng)典法』和『一步法』兩種。

2、環(huán)境空間消毒方案

試驗(yàn)臺(tái)、超凈臺(tái)、培養(yǎng)箱、液氮罐、移液器、門把手、電話等細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境

被支原體污染,可引起細(xì)胞的污染。應(yīng)定期對(duì)工作區(qū)域進(jìn)行消毒。

德國MB生產(chǎn)的Mycoplasma-offTM噴霧劑,或濕巾擦拭 5-10分鐘清除,對(duì)支原體、細(xì)菌、真菌、霉菌、孢子祛除確切有效。無殘留, 無腐蝕, 無致癌性,操作簡單方便。

 

 

qPCR法介紹:

熒光定量PCR法(qPCR):是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上,將『針對(duì)支原體特異性保守序列的探針』做熒光標(biāo)記,使PCR擴(kuò)增后的產(chǎn)物帶有熒光,利用熒光信號(hào)的變化和配套軟件,進(jìn)行DNA擴(kuò)增反應(yīng)的實(shí)時(shí)監(jiān)測,簡稱qPCR。

優(yōu)點(diǎn):①靈敏度高、特異性強(qiáng)。

②時(shí)間短,2-3小時(shí)出結(jié)果。

③檢測結(jié)果可定量。

④操作簡便。

缺點(diǎn):①對(duì)于已做支原體滅活處理的樣品,由于支原體DNA仍舊存在其中,PCR結(jié)果會(huì)出現(xiàn)假陽性。(可用培養(yǎng)法做補(bǔ)充驗(yàn)證)

②不同廠家生產(chǎn)的試劑盒質(zhì)量差異巨大(由于引物及內(nèi)在設(shè)計(jì)不同),需謹(jǐn)慎選擇,盡量在專業(yè)人員推薦指導(dǎo)下使用。

深夜三级福利在线播放-日韩精品一区二区在线天天狠天| 99精品只有久久精品免费-蜜臀一区二区三区精品久久久| 婷婷亚洲欧美综合丁香亚洲-超刺激国语对白在线视频| 色综合色综合久久综合频道-埃及艳后黄版在线观看| 天天干天天天天天天天-亚洲综合av在线三区| 一区二区三区日本韩国欧美-日本1区2区3区4区在线观看| 日韩精品一区二区三区粉嫩av-欧美亚洲国产中文字幕| 国语自产偷拍精品视频偷拍-国产伊人这里只有精品视频| 俄罗斯胖老太太黄色特级片-国产精品黑丝美腿美臀| 欧美日韩国产综合新一区-国产综合av一区二区三区| 欧美精品一区二区不卡-精品国产一区二区三区香蕉网址| 日韩精品人妻系列一区-亚洲女同性一区二区三区| 中文字幕人妻少妇第一页-隔壁的女孩在线看中文字幕| 久久网址一区二区精品视频-日产国产欧美视频一区精品| 日韩精品中文在线观看一区-亚洲bt欧美bt精品| 欧洲精品一区二区三区中文字幕-91久久国产综合久久蜜月精品| 亚洲国产精品一区二区av-日本一级黄色一区二区| 国产一区二区无套内射-国内精品久久久久久久齐pp| 婷婷亚洲欧美综合丁香亚洲-超刺激国语对白在线视频| 黄色美女网站大全中文字幕-欧美韩国日本一区二区| 国产在线一区二区三区欧美-久久偷拍精品视频久久| 国产老熟女激情小视频-成人一区二区人妻不卡视频| 一区二区三区女同性恋-熟妇高潮一区二区高清网络视频| 女主播啪啪大秀免费观看-精品99午夜福利影院| 久久人妻一区二区三区欧美-国内不卡的一区二区三区| 7m视频7m精品视频网站-亚洲综合香蕉视频在线| 亚洲欧美日韩二区三区-国产在线欧美一区日韩二区| mm在线精品视频在线观看-欧美国产日韩在线一区二区三区| 久久网址一区二区精品视频-日产国产欧美视频一区精品| 亚洲av日韩五月天久热精品-国产日韩欧美一区二区三区群战| 精品亚洲卡一卡2卡三卡乱码-一区三区二插女人高潮在线观看| 婷婷六月视频在线观看-久久亚洲综合国产精品| 欧美精品国产系列一二三国产真人-在线观看国产午夜视频| 五月婷婷六月在线观看视频-亚洲黑寡妇黄色一级片| 黑丝av少妇精品久久久久久久-中文字幕久久久人妻无码| 国模自慰一区二区三区-日韩一级黄色片天天看| 亚洲欧美一区二区中文-台湾中文综合网妹子网| 国产小黄片高清在线观看-涩涩鲁精品亚洲一区二区| 久久99国产综合精品女人-日韩一区二区三区在线不卡| 精品少妇一区二区18-一区二区三区日韩在线播放| 国产精品一区二区欧美视频-国产一区二区三区天码|