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如何選擇高品質(zhì)的胎牛血清?這幾個(gè)指標(biāo)很重要!

更新時(shí)間:2024-03-27  |  點(diǎn)擊率:539

熟悉細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的朋友應(yīng)該都知道,血清在整個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)的過程中發(fā)揮著重要作用。如何選擇高品質(zhì)的胎牛血清,才能盡可能保障實(shí)驗(yàn)?zāi)軌蝽樌M(jìn)行?需要關(guān)注哪些關(guān)鍵指標(biāo)?本期內(nèi)容,一起探高品質(zhì)胎牛血清的選擇標(biāo)準(zhǔn)有哪些。

 

血清的生產(chǎn)工藝

為了保證胎牛血清產(chǎn)品的均一性和穩(wěn)定性,胎牛血清生產(chǎn)需遵循相關(guān)規(guī)定進(jìn)行操作。一般來說,胎牛血清制備需經(jīng)過以下幾個(gè)步驟:

 

采集→離心→分離→無菌過濾

 

用來制作血清的牛血,是通過采集多頭牛的血液混合而成的,因此,想要在同一批次得到大批量品質(zhì)穩(wěn)定的血清,獲得大量健康、符合當(dāng)?shù)胤煞ㄒ?guī)的供體動(dòng)物,是先決條件。

 

采集(5-8月齡牛胚胎)、離心以及粗血清分離的過程,不能保證絕對(duì)的無菌,因此,整個(gè)過程中,無菌過濾就成為重中之重。嚴(yán)格的無菌過濾,能夠盡可能祛除細(xì)菌、支原體等微生物的污染,保證胎牛血清品質(zhì)。

 

Ausbian特級(jí)胎牛血清,經(jīng)過7重?zé)o菌過濾,最后3次為0.1μm濾膜過濾,有效祛除粗血清中的支原體等微生物,保證血清品質(zhì)優(yōu)異。

 

胎牛血清檢測指標(biāo)

血清出廠前,需要進(jìn)行嚴(yán)格的檢測,符合規(guī)定數(shù)值方能出廠,以下指標(biāo)可供參考:

 

PH6.7-8.2之間;

滲透壓:260-340mosm/kg之間;

血紅蛋白含量:<20mg/dL

總蛋白含量:30-50g/L;

白蛋白含量:14-34g/L;

α、β、γ球蛋白含量則以實(shí)際測量為準(zhǔn);

球蛋白(GGLB)是多種蛋白質(zhì)的混合物,包括具有防御作用而且含量較多的免疫球蛋白和補(bǔ)體、多種糖蛋白。胎牛血清中含有α-球蛋白、β-球蛋白、γ球蛋白三種。血清批次不同,球蛋白含量也不同,以實(shí)際測量為準(zhǔn)。

IgG:<250μg/mL;

內(nèi)毒素含量:<10EU/mL;

過高含量的內(nèi)毒素對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)影響巨大:高含量的內(nèi)毒素可以改變細(xì)胞外形、活化細(xì)胞,產(chǎn)生訊息傳遞物質(zhì)、抑制酶活性、抑制人工受的成功率等。血清中內(nèi)毒素含量過高,更容易導(dǎo)致細(xì)胞“亞健康",造成數(shù)據(jù)不準(zhǔn),或細(xì)胞狀態(tài)不良、老化、甚至死亡,導(dǎo)致試驗(yàn)中斷失敗。所以要盡量選擇內(nèi)毒素低的血清。

 

無菌檢測:陰性;

需要注意的是,厭氧菌、好氧菌、真菌(最容易污染細(xì)胞的酵母菌和霉菌都應(yīng)包括在內(nèi))以及支原體檢測。檢測結(jié)果應(yīng)全部為陰性,視為通過無菌檢測。

病毒檢測:陰性;

每個(gè)地區(qū)的法規(guī)會(huì)有些許區(qū)別,但牛副流感3型病毒(PI-3)、牛腹瀉病毒(BVD)、牛細(xì)小病毒等是任何國家和地區(qū)的檢測報(bào)告中,都應(yīng)標(biāo)注清楚的。

抗體檢測:陰性

 

胎牛血清效果檢測

一般檢測過程中,會(huì)用血清促進(jìn)細(xì)胞增殖的能力,來評(píng)判血清的使用效果。每一批次血清應(yīng)就克隆率、細(xì)胞毒性、細(xì)胞增殖密度、和倍增時(shí)間進(jìn)行檢查。

所有檢測結(jié)果應(yīng)符合相應(yīng)的規(guī)范。

 

通過胎牛血清的檢測報(bào)告,可初步判定胎牛血清的品質(zhì)。選擇高品質(zhì)的胎牛血清,是高效培養(yǎng)細(xì)胞的重要前提。

Ausbian特級(jí)胎牛血清為例:Ausbian進(jìn)口特級(jí)胎牛血清,精選內(nèi)毒素更低的批次,平均檢測結(jié)果<3EU/mL,有些甚至低于1EU/mL,其余指標(biāo)也均符合相關(guān)要求,讓細(xì)胞培養(yǎng)更安心!各類病原檢測也均為陰性,順利通過各項(xiàng)無菌檢測。蛋白指標(biāo)也都標(biāo)注清晰,多批次平行供應(yīng),滿足多種實(shí)驗(yàn)需求。專業(yè)幫助,匯集近二十年,千萬個(gè)血清用戶細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn),為各種細(xì)胞培養(yǎng)提供問題梳理分析,解決方案參考。


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